Фосфоліпіди сироватки крові і рівень гіпоксії пухлини хворих на рак шлунка: зв’язок з дисемінацією пухлинних клітин

Abstract

Вступ: Фосфоліпіди (ФЛ) як важливі компоненти клітинних мембран залучені в процеси, тісно пов’язані з клітинною проліферацією, злоякісною трансформацією, метастазуванням, загибеллю клітин та їх чутливістю до терапії. Знижений рівень оксигенації в пухлинній тканині сприяє підвищенню в ній вмісту ФЛ. Пухлина, в свою чергу, впливає на системний метаболізм ліпідів і ФЛ, що знаходить своє відображення в рівнях ФЛ у крові та кістковому мозку (КМ). Мета: виявити залежність між ФЛ сироватки крові, рівнем гіпоксії пухлини і наявністю дисемінованих пухлинних клітин (ДПК) у КМ хворих на рак шлунка (РШ). Об’єкт і методи. Досліджували периферичну кров (ПК), пунктати КМ, отримані перед оперативним втручанням, і зразки пухлинної тканини (операційний матеріал) 47 хворих на первинний РШ і ПК 17 донорів. Усі пацієнти були проінформовані про дослідження та дали свою згоду. Сироватку крові отримували загальноприйнятим методом. Виявлення ДПК (цитокератин-позитивних клітин) серед мононуклеарів КМ на цитоспінових препаратах проводили імуноцитохімічним методом із використанням МкАТ проти панцитокератинів (panCK) (clone АЕ1/АЕ3, Dako Cytomaiton, Данія). 31Р ЯМР-спектри (ЯМР — ядерний магнітний резонанс) сироватки крові були виміряні на спектрометрі Mercury-300BB (Varian, США), обладнаному Sparcs station при 121,5 МГц, зі спектральною шириною 12 000 Гц. Оцінка рівня гіпоксії пухлини на підставі визначення співвідношення PME/Pi методом 31Р ЯМР-спектроскопії виконували на спектрометрі Bruker 400 MHz (Widebore Ultrashield, AV-400 electronics, ФРН) при 161,976 МГц, зі спектральною шириною в 64724,9 Гц. Результати: концентрації всіх ФЛ, які реєструють на 31Р ЯМР-спектрах сироватки крові хворих на РШ, а саме — фосфатидилхоліну + плазмологенхоліну (РС + CPLAS), лізофосфатидилхоліну (LPC) та сфінгомієліну + фосфатидилетаноламiну (SM + PE), знижуються (на 37,6 і 69%; р<0,05; та 26,7% відповідно) у хворих порівняно з такими, які фіксують у донорській сироватці. Найбільш чутливим до метаболічних змін виявився LPC, значне зниження якого свідчить про несприятливий прогноз перебігу захворювання. Для пацієнтів із РШ встановлена медіана LPC (0,160 ммоль/л), яка є значно нижчою, ніж середнє значення концентрації LPC у донорській сироватці (250 ммоль/л). Згідно з розподілом рівнів гіпоксії щодо співвідношення PME/Pi, пухлини характеризуються як гіпоксичні, коли PME/Pi < 1,4, тоді як при PME/Pi > 1,4 пухлини є «задовільно» оксигенованими. Встановлено, що у випадку, коли в сиронизька, а первинна пухлина знаходиться в умовах гіпоксії (PME/Pi < 1,4), вірогідність появи ДПК у КМ зростає до 67% (p < 0,001) проти 37,5% — у випадку, коли в сироватці крові пацієнтів концентрація LPC > 0,160 ммоль/л, а первинна пухлина перебуває в умовах «задовільної» оксигенації (PME/Pi > 1,4). Висновки: Встановлено, що низькі концентрації ФЛ, особливо LPC, у сироватці крові хворих на РШ перебувають у залежності від гіпоксичного стану первинної пухлини, який свідчить про ступінь агресивності пухлини, та можуть бути використані у клінічній практиці з метою визначення ризику метастазування та прогнозу клінічного перебігу захворювання, особливо за умов індивідуалізації терапії.